- 30 марта 2023
- 7 минут
- 438
Особенности процесса гомогенизации живой среды: определение, этапы и методы
Статью подготовили специалисты образовательного сервиса Zaochnik.
Гомогенизация живых сред
Особенности процесса гомогенизации живой среды
Что понимают под гомогенизацией?
Гомогенизация живой среды является процессом создания устойчивой во времени однородной структуры среды, в ходе которого устраняются мельчайшие неоднородности среды.
Продолжительность сохранения гомогенности среды определяется тем, какие компоненты в нее входят. Есть множество сред, которые можно гомогенезировать при помощи специального устройства, который называется гомогенизатором. К таким средам относится, к примеру, пищевая среда.
Гомогенизатор для масла широко используется в пищевой промышленности, а при помощи гомогенизатора молока создается молоко, способное храниться на протяжении длительного времени.
Выделение целевого продукта в биотехнологии определяется способом накопления этого продукта в живой клетке. Кроме того, он может выделяться в культуральную жидкость. А еще, сама клеточная масса может стать продуктом гомогенизации.
Определенные сложности возникают при выделении продукта, накапливаемого в клетках. Происходит это следующим образом:
- клетки отделяют от культуральной жидкости;
- осуществляется процесс дезинтеграции (клетка разрушается);
- очищение целевого продукта от массы компонентов разрушенных клеток.
Процесс выделения продукта становится легче, если этот продукт экскретируется организмом продуцентом в культуральную жидкость.
Предварительная обработка — важный этап процесса гомогенизации живой среды. Она также состоит из нескольких этапов:
- сепарации и дезинтеграции;
- экстракции и хромотографии;
- центрифугирования и электрофореза.
Сепарация — начальный этап гомогенизации целевого продукта, на котором происходит разделение культуральной жидкости и биомассы. В некоторых случаях перед сепарацией изменяют pH, нагревают среды или добавляют коагулянты.
Сепарация осуществляется при помощи таких методов как:
- фильтрование;
- центрифугирование;
- флотация.
Методы гомогенизации живой среды
Выделяют несколько ключевых групп среди методов гомогенизации клеток и прочих типов сред растительного и животного происхождения.
Есть физические методы гомогенизации, к которым относят:
- растирание с твердыми материалами. В специальной ступке с использованием пестика клетки растирают с песком или абразивным порошком. Отмечаются неплохие результаты в случае продавливания клеток и смешивания с абразивными частицами. В этом случае используют пресс Хьюза. Есть и модификация такого метода, которая представляет собой продавливание клеток при температуре −25 градусов;
- разрушение клетки в живой среде. Разрушение происходит в результате вращения лопастей и поршня, при поступательном движении вверх или вниз шаров гомогенизаторов;
- разрушение клеток, происходящее под воздействием методов высокого давления. Таким образом в большинстве случаев разрушаются клетки микробов. Здесь используют специальные прессы, среди которых наиболее распространенный — френч-пресс. Важно отметить, что разрушение клеток идет под давлением, которое оказывает влияние на клеточную суспензию через узкое отверстие;
- разрушение клеток при помощи ультразвука, замораживания и последующего оттаивания, декомпрессии. Происходит резкое сжатие клеточной суспензии, а затем сброс давления.
Также выделяют и химические методы гомогенизации, которые основаны на том, что в живую среду добавляют различные органические растворители, такие как бензол, толуол, хлороформ. Применяется и осмотический шок, и множество химико-ферментативных методов.
Практикуется и добавление антибиотиков. Клеточные стенки могут перевариваться при помощи различных ферментов или сложных комплексных препаратов.
В некоторых случаях гомогенизация протекает при помощи консервации. Здесь используют:
- обезвоживание;
- воздушная сушка при различных температурах;
- сушка в кипящем слое;
- лиофилизация;
- замена воды в живой среде на неводные растворители вроде глицерина, а также хранение штаммов микроорганизмов на различных твердых подложках.
Также химические методы гомогенизации — это:
- замораживание;
- добавление антибиотиков;
- изменение ионной силы и pH.
Еще проводят стабилизацию продукта, которая осуществляется при помощи сушки и обезвоживания, добавления различных неорганических ионов и даже антибиотиков. Нередко добавляются различные органические ионы и растворители.
Чтобы стабилизировать биологическую среду, применяют разные биотехнологические процессы. К примеру, если сталкиваются с порчей меланжа, то для остановки процесса удаляют из него углеводы. На меланже выращиваются пропионовые бактерии, которые отвечают за повышение его питательной ценности. Таким образом меланж насыщается органическими кислотами и витамином В12.
Модификация — еще один популярный способ гомогенизации живой среды.
Под модификацией понимают такое изменение питательной среды, которое ставить перед собой цель «заготовить» конкретный продукт жизнедеятельности.
К примеру, пенициллин G, который образуют Penicillin potatum, модифицируют для того, чтобы получить ампициллин и прочие полусинтетические пенициллины.
Модификация позволяет придать продукту специальную оптическую асимметрию. В таком случае биологически объект начинает выборочно потреблять один из изморов, создавая таким образом в среде свой оптический антипод.
Некоторые ферменты и гормоны также получают в результате гомогенизации. К примеру, инсулин быка. У него остригают аминокислотные остатки, что делает этот инсулин таким же, как инсулин, находящийся в человеческом организме. В этом случае продукт медленно и под высоким давлением подается к гомогенизирующему клапану. Для процесса гомогенизации достаточно даже одного такого клапана — в случае обработки рассеиванием. Но одновременно могут использоваться и два гомогенизирующих клапана.
Как видно, процесс гомогенизации не является простым, однако с его помощью вносятся необходимые изменения в определенную живую среду, а это делает ее стабильнее и устойчивее.
Сохранить статью удобным способом